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Bradford蛋白定量試劑盒

產品簡介

Bradford蛋白定量試劑盒基于考馬斯亮藍G-250與蛋白質結合后, 產生藍色化合物,反應迅速而穩定。可通過檢測595nm的光吸收值的大小來計算蛋白的含量。

產品型號:AP12L015
更新時間:2025-06-08
廠商性質:生產廠家
訪問量:1928
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品牌其他品牌貨號AP12L015
規格500T供貨周期現貨
主要用途通過檢測595nm的光吸收值的大小來計算蛋白的含量應用領域生物產業
Bradford蛋白定量試劑盒

產品描述
  Bradford 法蛋白定量是基于考馬斯亮藍G-250與蛋白質結合后, 產生藍色化合物,反應迅速而穩定。反應化合物在465-595nm處有大的光吸收值,化合物顏色的深淺與蛋白濃度的高低成正比關系,因此可通過檢測595nm的光吸收值的大小來計算蛋白的含量。
訂購信息

產品名稱 貨號 規格 價格
Bradford蛋白定量試劑盒 AP12L015 500 T 128


產品組分

產品編號 產品組成 包裝規格
AP12L015 Bradford試劑 A 100 mL
蛋白標準(5mg/ml BSA) 1 mL
說明書 一份

保存方法
  冰袋運輸,Bradford試劑A 2-8°C保存,蛋白標準品-20°C保存,保質期一年。
使用方法

方案一、試管檢測
1、試劑準備
(1)取適量5mg/ml蛋白標準,PBS稀釋至終濃度為2mg/ml蛋白標準。配制后可立即使用,也可以-20°C長期保存。
(2)稀釋BSA標準品:用與待測蛋白樣品相一致的稀釋液按下表稀釋BSA標準品。
表1:BSA標準品配制表

標準品編號 稀釋液體積μl 標準品用量μl 標準品濃度μg/ml
1 0 100 2000
2 50 150 1500
3 200 200 1000
4 200 200(從3號管中取) 500
5 200 200(從4號管中取) 250
6 200 200(從5號管中取) 125
7 200 0 0

(3)取干凈的試管,將30μl稀釋好的BSA標準品分別加到作好標記的試管中。
(4)取干凈的試管,分別加入30μl待測蛋白樣品(原液或稀釋液),并作好標記,推薦每個樣品做2-3 個平行反應。
2、樣品孵育及檢測
(1)向上一步驟配制的不同濃度的標準品BSA和待測樣品試管中各加入1.5ml Bradford蛋白定量試劑,充分混勻,室溫放置10分鐘。
(2)用分光光度計測定595nm 處的吸光值。
3、制作標準曲線和計算樣品濃度
(1)利用Excel或其他軟件繪制標準曲線,并計算樣品中的蛋白濃度。
(2)如果所得到的蛋白濃度不在檢測范圍內,請重新稀釋樣品后再次測定。
方案二、微孔檢測
1、試劑準備
(1)將按表2稀釋好的BSA標準品和待測蛋白樣品(原液或稀釋液)各5μl分別加到作好標記的96孔板微孔中。推薦每個樣品做2-3 個平行反應。
表2:BSA標準品配制表

標準品編號 稀釋液體積μl 標準品用量μl 標準品濃度μg/ml
1 0 20 2000
2 10 30 1500
3 40 40 1000
4 40 40(從3號管中取) 500
5 40 40(從4號管中取) 250
6 40 40(從5號管中取) 125
7 40 0 0

2、樣品孵育及檢測
(1)每孔加入250μl Bradford蛋白定量試劑,充分混勻,蓋上96孔板蓋,室溫放置10 分鐘。
(2)用酶標儀測定595nm處的吸光值。
3、制作標準曲線和計算樣品濃度
(1)繪制標準曲線,計算樣品中的蛋白濃度。
(2)如果所得到的蛋白濃度不在檢測范圍內,請重新稀釋樣品后再次測定。
注意事項

1、樣品中若含有去垢劑會影響檢測結果,請試用 BCA 蛋白濃度測定試劑盒;
2、要得到更為準確的蛋白濃度結果,每個蛋白梯度和樣品均需做復孔, 每次均應做標準曲線;
3、需準備 37°C水浴或溫箱、酶標儀或普通分光光度計,測定波長為 465-595nm 之間,595nm合適。酶標儀需與 96孔酶標板配套使用。使用分光光度計測定蛋白濃度時,試劑盒測定的樣品數量會因此而減少。使用溫箱孵育時,應注意防止因水份蒸發影響檢測結果。
4、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。


 

 

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