pfu Plus DNA高保真聚合酶 使用說(shuō)明書(shū)

pfu Plus DNA高保真聚合酶

產(chǎn)品描述

用于PCR的DNA polymerase大致可分為2大類(lèi)。一類(lèi)是從嗜熱菌中分離出來(lái)的被稱(chēng)為polⅠ型的聚合酶，以Taq、Tth DNA polymerase為代表。另一類(lèi)是從超嗜熱Archaea中分離出來(lái)的被稱(chēng)為α型的聚合酶，如KOD、Pfu DNA polymerase屬于該類(lèi)。α型酶具有polⅠ型酶所沒(méi)有的3'→5核酸外切酶活性。該活性被稱(chēng)為Proof-reading（校正）活性，是PCR反應(yīng)高保真性的原因。

李記生物研發(fā)的Pfu Plus DNA polymerase是新一代Pfu高保真聚合酶，同時(shí)具有3’→5’外切酶活性（校對(duì)功能），和DNA擴(kuò)增性。Pfu-Plus DNA聚合酶的錯(cuò)誤率為0.25×10-6，比Taq DNA聚合酶低100倍，比Pfu DNA聚合酶低10倍，它能產(chǎn)生平末端PCR產(chǎn)物。Pfu-Plus DNA polymerase每kb延伸僅需要15~30秒，比KOD-Plus高保真酶快1倍，比普通Pfu 酶快4-6倍。

Pfu-Plus DNA聚合酶在擴(kuò)增長(zhǎng)度10kd以?xún)?nèi)的DNA片段均表現(xiàn)優(yōu)異。Pfu-Plus DNA polymerase適用于點(diǎn)突變及長(zhǎng)片段或有難度的PCR應(yīng)用。

運(yùn)輸與保存方法

冰袋運(yùn)輸，收到貨后-20℃避光干燥保存，避免反復(fù)凍融，保存條件下1年有效。

使用方法

應(yīng)用實(shí)例

圖1：100μL反應(yīng)體系，1個(gè)單位Pfu Plus DNA聚合酶，延伸3分鐘。

lane1:4kb, lane2:1.4kb, lane3-10:7-8 kb.

圖2：100 μL反應(yīng)體系，逐級(jí)降低 Pfu-Plus DNA聚合酶用量，延伸20秒。

Lane1:20U, Lane2:10U, lane3:5U, lane4:2.5U, lane5:1.25U, lane6:0.63U, lane7:0.31U.