高保真聚合酶的特征概述

 

  高保真聚合酶共性，此酶zui早在大腸桿菌中發(fā)現(xiàn)，以后陸續(xù)在其他原核生物及微生物中找到。這類酶的共同性質(zhì)是：[1]以脫氧核苷酸三磷酸（dNTP）為前體催化合成DNA;[2]需要模板和引物的存在;[3]不能起始合成新的DNA鏈；[4]催化dNTP加到生長(zhǎng)中的DNA鏈的3'-OH末端；[5]催化DNA合成的方向是5'→3'。下面首先介紹大腸桿菌的DNA聚合酶，然后簡(jiǎn)略說(shuō)明一下其他原核生物的DNA聚合酶和真核生物DNA聚合酶。

 

  高保真聚合酶功能，聚合作用，在引物RNA'-OH末端，以dNTP為底物，按模板DNA上的指令由DNApolⅠ逐個(gè)將核苷酸加上去，就是DNApolⅠ的聚合作用。酶的專一性主要表現(xiàn)為新進(jìn)入的脫氧核苷酸必須與模板DNA配對(duì)時(shí)才有催化作用。dNTP進(jìn)入結(jié)合位點(diǎn)后，可能使酶的構(gòu)象發(fā)生變化，促進(jìn)3'-OH與5'-PO4結(jié)合生成磷酸二酯鍵。若是錯(cuò)誤的核苷酸進(jìn)入結(jié)合位點(diǎn)，則不能與模板配對(duì)，無(wú)法改變酶的構(gòu)象而被3'-5'外切酶活性位點(diǎn)所識(shí)別并切除之。