說說溶酶體染色試劑盒的特點(diǎn)概述

更新時(shí)間：2018-05-22

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溶酶體染色試劑盒是設(shè)計(jì)用來標(biāo)記活細(xì)胞的線粒體的，使之帶上不同顏色的熒光。本試劑盒使用一種專屬染料，選擇性地在溶酶體中積累。這種LysoBrite溶酶體指示劑是一種疏水性復(fù)合物，可以輕易地滲透進(jìn)入活細(xì)胞中，且當(dāng)進(jìn)入細(xì)胞后就被鎖定在線粒體中。這種熒光性溶酶體指示劑可以在線粒體中保留很長時(shí)間，因?yàn)樵撝甘緞в心芏ㄎ挥诩?xì)胞的基團(tuán)。其關(guān)鍵特征是其染色效率顯著性提高。 Cell Navigator溶酶體染色試劑盒標(biāo)記方法十分穩(wěn)定，需要親手操作的地方很少。它可以用于許多熒光研究中，例如微孔板分析，免疫組化和流式細(xì)胞術(shù)。它也可以用于多種不同類型的研究中，包括細(xì)胞粘附性、趨化性、多藥物抗性、細(xì)胞活性、細(xì)胞凋亡和細(xì)胞毒性的研究。

溶酶體染色試劑盒細(xì)胞化學(xué)染色法，SA-βgal在pH6.0時(shí)，可將 5-溴-4-氯-3-吲哚基 β-D-吡喃半乳糖苷（5-bromo-4-chloro-3-indoyl β-D-galactopyranoside ，X-gal)水解，產(chǎn)生不溶于水的藍(lán)色物質(zhì)。這種藍(lán)色產(chǎn)物相當(dāng)穩(wěn)定，固定干燥后避光可保存幾個(gè)月。通過計(jì)算總?cè)后w中藍(lán)色細(xì)胞的數(shù)量，可以很容易地確定SA-β-半乳糖苷酶陽性的細(xì)胞比例，即衰老細(xì)胞的比例。但是需要注意的是，在所有細(xì)胞中普遍存在酸性半乳糖苷酶（acidic β-galactosidase），在pH4.0時(shí)發(fā)揮作用。其實(shí)SA-βgal發(fā)揮作用的zui適pH為4.5，但是在pH4.5時(shí)，酸性半乳糖苷酶也會(huì)水解底物，因此需要使用SA-βgal次適pH6.0，才能確保藍(lán)色產(chǎn)物是由于SA-βgal的作用而產(chǎn)生的。通常我們使用pH為6.0的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液。

溶酶體染色試劑盒目前針對溶酶體的定位也主要圍繞酸性磷酸酶展開。經(jīng)典的溶酶體熒光染色試劑盒（藍(lán)/綠/橙/紅色）— 超越LysoTracker！LysoTracker系列溶酶體熒光染料被廣泛應(yīng)用。然后由于其細(xì)胞毒性，LysoTracker在染色幾個(gè)小時(shí)后便失去檢測效應(yīng)，更不能隨細(xì)胞傳代而持續(xù)示蹤染色。另外，LysoTracker的較容易淬滅的光學(xué)不穩(wěn)定性也經(jīng)常被一些研究者所詬病。在此，艾美捷特向您推薦由LysoBrite新一代溶酶體專屬熒光染料組成的系列溶酶體熒光染色試劑盒產(chǎn)品。作為新一代熒光染色，LysoBrite具有更低細(xì)胞毒性、更亮的熒光強(qiáng)度，和更高的熒光耐淬滅性。