細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一

　　細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來(lái)，這樣在需要的時(shí)候再?gòu)?fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。而且適度地保存一定量的細(xì)胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種，起到了細(xì)胞保種的作用。除此之外，還可以利用細(xì)胞凍存的形式來(lái)購(gòu)買(mǎi)、寄贈(zèng)、交換和運(yùn)送某些細(xì)胞。細(xì)胞凍存時(shí)向培養(yǎng)基中加入保護(hù)劑--終濃度5%．15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO)，可使溶液冰點(diǎn)降低，加之在緩慢凍結(jié)條件下，細(xì)胞內(nèi)水分透出，減少了冰晶形成，從而避免細(xì)胞損傷。采用"慢凍快融"的方法能較好地保證細(xì)胞存活。標(biāo)準(zhǔn)冷凍速度開(kāi)始為-1到-2℃/min，當(dāng)溫度低于-25℃時(shí)可加速，到-80℃之后可直接投入液氮內(nèi)(-196℃)。免疫細(xì)胞凍存液一次加多少通用型細(xì)胞凍存液配方是多少？

　　流凍存液。同時(shí)這樣的保護(hù)劑也被積極用于生物研究中，用于保存活的生物材料等等。很多年來(lái)，人們使用甘油（Glycerol），利用它能在液氮的溫度下對(duì)血液細(xì)胞和公牛精子的凍存保存的作用，然而它卻不能讓整個(gè)組織免受凍存過(guò)程的損傷。而對(duì)于凍存液來(lái)說(shuō)，它之所以能夠保護(hù)生物材料免受凍存損傷的原因主要是來(lái)源于下面兩個(gè)方面：雖然一些或組織能夠耐受細(xì)胞外的冰晶，但是在凍存過(guò)程的中如果在細(xì)胞內(nèi)形成了任何微小冰晶時(shí)對(duì)細(xì)胞來(lái)說(shuō)都是致命的。

　　解凍解凍后，應(yīng)該立即鋪板在預(yù)先包被好的培養(yǎng)皿中。開(kāi)始之前，提前準(zhǔn)備好以下材料：試管，恢復(fù)至室溫的培養(yǎng)基，預(yù)先包被的培養(yǎng)板，確保整個(gè)解凍復(fù)蘇程序可以在較短的時(shí)間內(nèi)完成。注意：不要在37°C水浴中加熱培養(yǎng)基。1.在37°C水浴中快速解凍，持續(xù)溫和的在水中晃動(dòng)凍存管，直到剩余少量細(xì)胞還處于結(jié)冰狀態(tài)。2.水浴中取出凍存管，用70%的酒精或異丙醇擦拭除菌。3.用2mL的血清移液管把細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到一個(gè)15mL的錐形試管。注意：用2mL的血清移液管代替1mL的頭可以減少細(xì)胞聚集體的分解。無(wú)血清快速細(xì)胞凍存液加入適量的細(xì)胞凍存液于離心管中，調(diào)節(jié)細(xì)胞濃度至1~5×106/ml。