免費咨詢熱線

021-50778506

技術文章

TECHNICAL ARTICLES

當前位置:首頁技術文章蛋白酶K具有廣泛的底物特異性

蛋白酶K具有廣泛的底物特異性

更新時間:2019-12-27點擊次數:1892
 
  蛋白酶K具有廣泛的底物特異性。即便存在洗滌劑的情況下,其仍可降解許多非變性狀態的蛋白質。蛋白酶K分離自一種可在角質上生長的真菌白色側齒霉菌(Engyodontiumalbum)(前稱腐生真菌(Tritirachiumalbum)。因此,蛋白酶K能夠降解非變性狀態的角質(頭發),因而稱為“蛋白酶K”。1其切割的主要位點為帶有封閉氨基基團、鄰近脂族或芳香族氨基酸羧基端的肽鍵。因其廣泛的特異性,其較為常用。
  蛋白酶K(ProteinaseK),相對分子量約為29.3kDa,是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶。可切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵,應用廣泛,可用于制備脈沖電泳的染色體DNA,蛋白質印跡以及去除DNA和RNA制備中的核酸酶等實驗,蛋白酶K的一般工作濃度是50—100µg/ml。因蛋白酶K在變性劑如SDS(1%)中可提高其活性,所以在使用中,常根據所用緩沖液是否含有SDS、尿素、pH、溫度等因素確定具體的工作濃度。蛋白酶K在較廣的pH范圍內(pH4-12.5)均有活性。
  蛋白酶K有兩個Ca2+結合位點,它們離酶的活性中心有一定距離,與催化機理并無直接關系。然而,如果從該酶中除去Ca2+,由于出現遠程的結構變化,催化活性將喪失80%左右,但其剩余活性通常已足以降解在一般情況下污染核酸制品的蛋白質。所以,蛋白酶k消化過程中通常也加入EDTA(以抑制依賴于mg2+的核酸酶的作用)。但是,如果要消化對蛋白酶k具有較強耐性的蛋白,如角蛋白一類,則可能需要使用含有1mmol/lCa2+而不含EDTA的緩沖液。在消化完畢后、純化核酸前要加入EGTA(ph8.0)至終濃度為2mmol/l,以鰲合Ca2+。

掃碼加微信

服務熱線

021-50778506

上海市浦東新區紫萍路908弄

lsj0027@obiosh.com

Copyright © 2025和元李記(上海)生物技術有限公司 All Rights Reserved    備案號:滬ICP備2023007219號-1

技術支持:化工儀器網    管理登錄    sitemap.xml

主站蜘蛛池模板: 狠狠色成人综合首页| 一个色综合久久| 狠狠色狠狠色综合| 2020久久精品亚洲热综合一本| 琪琪五月天综合婷婷| 天天综合天天看夜夜添狠狠玩| 一本色道久久88综合日韩精品| 日日狠狠久久偷偷色综合0| 色欲综合久久中文字幕网| 欧美日韩一区二区综合在线| 色综合色综合色综合| 狠狠色丁香久久婷婷综合| 综合五月激情五月开心婷婷| 亚洲欧美日韩国产综合在线| 欧美精品色婷婷五月综合| 国产精品国产欧美综合一区| 伊人久久大香线焦综合四虎| 人妻 日韩 欧美 综合 制服| 色综合网站国产麻豆| 亚洲高清无码综合性爱视频| 国产成人亚洲综合无码| 18和谐综合色区| 五月天激情综合网丁香婷婷| 亚洲欧美伊人久久综合一区二区| 婷婷色中文字幕综合在线| 久久天堂AV综合合色蜜桃网| 亚洲综合激情另类专区| 国产综合久久久久| 久久香综合精品久久伊人| 色爱区综合激情五月综合色| 亚洲国产欧美国产综合一区| 69国产成人综合久久精品| 97久久婷婷五月综合色d啪蜜芽| 亚洲狠狠成人综合网| 97久久天天综合色天天综合色hd| 一本久久综合亚洲鲁鲁五月天亚洲欧美一区二区 | 久久久久噜噜噜亚洲熟女综合| 亚洲另类欧美综合久久图片区| 久久亚洲高清综合| 日日狠狠久久偷偷色综合免费| 亚洲日韩在线中文字幕综合|