PicoGreen熒光染料可對(duì)DNA樣品進(jìn)行定量

　　PicoGreen熒光染料法是一種靈敏的雙鏈DNA檢測(cè)方式，通過Modulus檢測(cè)儀可以檢測(cè)到pg級(jí)的微量DNA。這種方法主要用來測(cè)定微量的DNA殘留，或?qū)NA樣品進(jìn)行定量。

　　作為DNA染色劑之一的PicoGreen熒光染料特異性地與樣品中雙鏈DNA結(jié)合，產(chǎn)生熒光信號(hào)。PicoGreen技術(shù)可以檢測(cè)到低達(dá)0.5納克雙鏈DNA的變化。DNA的微量增加引起熒光信號(hào)強(qiáng)度或相對(duì)熒光單位（RFU）的顯著增加。其自發(fā)熒光忽略不計(jì)，重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)差異低，不受樣品化學(xué)成分的干擾。

　　Picogreen是一種極為靈敏的熒光核酸染料，常用于雙鏈DNA的定量檢測(cè)。歷來DNA濃度的測(cè)定在cDNA文庫(kù)的構(gòu)建，DNA亞克隆、PCR產(chǎn)物的估測(cè)等領(lǐng)域中具有重要意義。疫苗等生物制品中殘留微量DNA的檢測(cè)更是直接關(guān)系到人類的健康。

　　Picogreen僅在與DNA雙鏈結(jié)合后才發(fā)出熒光，且所產(chǎn)生的熒光與DNA濃度呈正比，在存在ssDNA、RNA和單體核苷酸的條件下，可以選擇性地檢測(cè)低至25pg/ml的dsDNA。該分析在三個(gè)數(shù)量級(jí)范圍內(nèi)呈線性，且?guī)缀鯚o序列依賴性，可以地測(cè)量多個(gè)來源的DNA，包括基因組DNA、病毒DNA、小量提取DNA或PCR擴(kuò)增產(chǎn)物。可用熒光分光光度計(jì)或熒光酶標(biāo)儀讀數(shù)，Ex/Em=480nm/520nm。